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正確的顯微鏡操作步驟 日期:2016.11.18
一)正置顯微鏡

1、安放
清潔、平穩,要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側,距離桌邊3~4厘米處。

2、清潔
檢查顯微鏡是否有毛病,是否清潔,鏡身機械部分可用幹淨軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭,如有膠或粘汙,可用少量二甲苯清潔之。

3、對光

鏡筒升至距載物台1~2厘米處,低倍鏡對準通光孔。調節光圈和反光鏡,光線強時用平麵鏡,光線弱時用凹麵鏡,反光鏡要用雙手轉動。
若使用的為帶有光源的顯微鏡,可省去次步驟,但需要調節光亮度的旋鈕。

4、安裝標本

將玻片放在載物台上,注意有蓋玻片的一麵一定朝上。用彈簧夾將玻片固定,轉動平台移動器的旋鈕,使要觀察的材料對準通光孔中央。

5、調焦

調焦時,先旋轉粗調焦旋鈕慢慢降低鏡筒,並從側麵仔細觀察,直到物鏡貼近玻片標本,然後左眼自目鏡觀察,左手旋轉粗調焦旋鈕抬升鏡筒,直到看清標本物像時停止,再用細調焦旋鈕回調清晰。
操作注意:不應在高倍鏡下直接調焦;鏡筒下降時,應從側麵觀察鏡筒和標本間的間距;要了解物距的臨界值。
若使用雙筒顯微鏡,如觀察者雙眼視度有差異,可靠視度調節圈調節。另外雙筒可相對平移以適應操作者兩眼間距。

6、觀察

若使用單筒顯微鏡,兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調節焦距,使物象清晰並移動標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時應將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重複。
光強的調節:一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強。除調節反光鏡或光源燈以外,虹彩光圈的調節也十分重要。

(1)低倍鏡觀察

觀察任何標本時,都必須先使用低倍鏡,因為其視野大,易發現目標和確定要觀察的部位。

(2)高倍鏡觀察

從低倍鏡轉至高倍時,隻需略微調動細調焦旋鈕,即可使物像清晰。
使用高倍鏡時切勿使用粗調焦旋鈕,否則易壓碎蓋玻片並損傷鏡頭。
轉動物鏡轉換器時,不可用手指直接推轉物鏡,這樣容易使物鏡的光軸發生偏斜,轉換器螺紋受力不均勻而破壞,最後導致轉換器就會報廢。

(3)油鏡的觀察

先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央後,再換油鏡觀察。油鏡觀察前,應將顯微鏡亮度調整至最亮,光圈完全打開。
使用油鏡時,先在蓋玻片上滴加一滴香柏油(鏡油),然後降低鏡筒並從側麵仔細觀察,直到油鏡浸入香柏油並貼近玻片標本,然後用目鏡觀察,並用細調焦旋鈕抬升鏡筒,直到看清標本的焦段時停止並調節清晰。
香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢後一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油,並再用幹的擦鏡紙擦去多餘二甲苯。

7、結束操作

觀察完畢,移去樣品,扭轉轉換器,使鏡頭V字型偏於兩旁,反光鏡要豎立,降下鏡筒,擦抹幹淨,並套上鏡套。
若使用的是帶有光源的顯微鏡,需要調節亮度旋鈕將光亮度調至最暗,再關閉電源按鈕,以防止下次開機時瞬間過強電流燒壞光源燈。

(二)倒置顯微鏡

倒置顯微鏡與正置顯微鏡的主要區別在於物鏡位於載物台下方,這樣有利於觀察時在上方對樣品進行一些實時操作。
倒置顯微鏡操作過程基本與雙筒的正置顯微鏡相似,需注意以下幾點:
觀察時可調節鉸鏈式雙目目鏡至舒適的位置。
組織培養液或水濺到載物台上、物鏡上或顯微鏡鏡架上可能會損傷設備。如果濺上後,應該立即從牆上插座拔下電源線,擦去濺出液或水。
一定要輕柔轉動光強調節鈕,不要試圖將旋鈕轉過終點位置。使用後一定要先將燈的強度調至最小再關電源。
使用後要旋轉三孔轉換器,使物鏡鏡片置於載物台下側,防止灰塵的沉降。

(三)實體顯微鏡

又稱體視顯微鏡或解剖顯微鏡。操作步驟基本和雙筒正置顯微鏡類似:
取用解剖鏡時,移動需用雙手,保持穩重。若需連鏡箱搬動,應將鏡箱鎖好,同時鏡箱的鑰匙必須拔除。
鏡管上若有防塵罩,應取下並換上目鏡及眼罩。
將樣品置於玻片上或蠟盤中再放到載物盤上待觀察。擰開鎖緊螺絲,把鏡體先上升到一定高度,然後鎖緊鏡體。
觀察前可先轉動目鏡管以適合眼間距。雙眼視度差異可用視覺圈調節。
對焦時,轉動升降螺絲不能太快或強行扭轉,謹防損壞齒輪。
如需放大觀察,再轉動倍率盤直到所需放大倍率。物像越大,光線越暗,必須調好光源選擇好背景物。 
用畢後,先將載物盤上的東西拿走,鬆開鎖緊螺絲將鏡體放下並鎖緊。取出目鏡並換上防塵罩。將元件全部放回,注意不要與其它鏡互換。用布把鏡身擦幹淨,放入鏡箱內,鎖緊鏡箱。
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